فرداد آزما

تفاوت PCR معمولی با Real-Time PCR چیست؟
آذر 2, 1404

  تفاوت PCR معمولی با Real-Time PCR چیست؟ در آزمایشگاه‌های مولکولی، دو فناوری پایه‌ای بیشترین استفاده را دارند: PCR معمولی (ترمال سایکلر) و Real-Time PCR (qPCR). هر دو روش DNA را تکثیر می‌کنند، اما سطح دقت، نوع خروجی، کاربرد و قابلیت‌های تحلیلی آن‌ها بسیار متفاوت است.     ۱) PCR معمولی چیست؟ PCR معمولی یا […]

 

تفاوت PCR معمولی با Real-Time PCR چیست؟

در آزمایشگاه‌های مولکولی، دو فناوری پایه‌ای بیشترین استفاده را دارند:
PCR معمولی (ترمال سایکلر) و Real-Time PCR (qPCR).
هر دو روش DNA را تکثیر می‌کنند، اما سطح دقت، نوع خروجی، کاربرد و قابلیت‌های تحلیلی آن‌ها بسیار متفاوت است.

 

تفاوت PCR معمولی با Real-Time PCR
تفاوت PCR معمولی با Real-Time PCR

 

۱) PCR معمولی چیست؟

PCR معمولی یا ترمال سایکلر دستگاهی است که تنها وظیفه‌اش تکثیر DNA است. نتیجه این تکثیر فقط در پایان و با روش
الکتروفورز ژل
قابل مشاهده است. در این روش تنها به “وجود یا عدم وجود باند” دسترسی داریم.

PCR معمولی چیست؟
PCR معمولی چیست؟

کاربردهای PCR معمولی

  • تحقیقات پایه و آکادمیک
  • کلونینگ و تکثیر ژن
  • بررسی حضور یا عدم حضور یک ژن
  • تست‌های ساده مولکولی

 

مزایای PCR معمولی

  • هزینه خرید پایین‌تر
  • عدم نیاز به مواد فلورسنت
  • روند ساده و کم‌هزینه
  • مناسب برای حجم‌های زیاد تست‌های تکراری
مزایا و کاربرد‌های PCR
مزایا و کاربرد‌های PCR

۲) Real-Time PCR چیست؟

Real-Time PCR یا qPCR علاوه بر تکثیر DNA، میزان تکثیر را در لحظه اندازه‌گیری می‌کند. این دستگاه خروجی
Ct (Cycle Threshold)
تولید می‌کند که نشان‌دهنده مقدار DNA اولیه است.

کاربردهای Real-Time PCR

  • ویروس‌شناسی و تست‌های عفونی (HBV، HPV، COVID و…)
  • تشخیص سرطان و ژنتیک
  • کمی‌سازی RNA و DNA
  • تست‌های HRM و Melt Curve
  • Allele Discrimination

مزایای Real-Time PCR

  • دقت بالا و حساسیت تا “۱ نسخه”
  • تحلیل کمی + کیفی
  • عدم نیاز به ژل
  • سرعت بالای تحلیل داده
Real-Time PCR چیست؟
Real-Time PCR چیست؟

۳) تفاوت PCR معمولی با Real-Time PCR

ویژگی PCR معمولی Real-Time PCR
نمایش نتیجه باند روی ژل Ct + نمودار فلورسنت
دقت متوسط بسیار بالا
کمی‌سازی DNA ندارد دارد
مصرف مواد کم نیازمند فلورسنت
کاربرد تحقیقاتی تشخیصی / حرفه‌ای

۴) معرفی RePure-A – ترمال سایکلر حرفه‌ای

دستگاه RePure-A یک ترمال سایکلر پیشرفته با سیستم‌عامل اندروید، صفحه‌نمایش ۱۰.۱ اینچی و کنترل از طریق موبایل است.
طبق بروشور رسمی دستگاه،
بیشترین سرعت رامپ آن ۹.۵ درجه در ثانیه
است که آن را در رده سریع‌ترین ترمال سایکلرهای بازار قرار می‌دهد.

  • سیستم عامل: Android
  • صفحه نمایش لمسی 10.1 اینچ
  • حداکثر سرعت گرم/سرد شدن: 9.5°C/s
  • Hot Lid هوشمند: 30–115°C
  • اتصال WiFi و کنترل با موبایل
  • بازیابی خودکار پس از قطع برق

این ویژگی‌ها باعث می‌شود RePure-A برای آزمایشگاه‌های تحقیقاتی، کلونینگ، QC و کارهای حجم بالا انتخاب بسیار مناسبی باشد.

دستگاه RePure-A
دستگاه RePure-A

۵) معرفی Q9600 Pro – دستگاه Real-Time PCR نسل جدید

Q9600 Pro یک سیستم qPCR بسیار دقیق و سریع است که بر اساس بروشور رسمی،
تمام ۹۶ چاهک را تنها در ۵ ثانیه اسکن می‌کند
و دارای حساسیت در حد “یک نسخه DNA” است.

ویژگی‌های کلیدی Q9600 Pro

  • صفحه 12.1 اینچ لمسی قابل تنظیم
  • حداکثر نرخ رامپ: 8°C/s
  • حساسیت 1–10 نسخه
  • دقت دمایی بسیار بالا (±0.1)
  • اسکن کامل 96 خانه در 5 ثانیه
  • دیتکتور اپتیک قوی + LED با عمر طولانی
  • خروجی گزارش: PDF، Excel، CSV، TXT
  • قابلیت اتصال به LIS و مانیتورینگ از راه دور

فلورسنت‌های کالیبره‌شده

  • FAM / SYBR Green / EVA Green
  • HEX / VIC / JOE / TET / CY3
  • ROX / Texas Red
  • Cy5 / Cy5.5
دستگاه Real-Time PCR
دستگاه Real-Time PCR

این دستگاه برای آزمایشگاه‌هایی که کار تشخیصی، ویروس‌شناسی، ژنتیک و oncology انجام می‌دهند بهترین انتخاب است.

۶) چه زمانی PCR معمولی کافی است و چه زمانی باید Real-Time PCR انتخاب شود؟

PCR معمولی مناسب است اگر:

  • کار کلونینگ یا تحقیقات پایه انجام می‌دهید
  • نیاز به نتایج کمی ندارید
  • بودجه محدود است
  • فقط حضور یا عدم حضور یک ژن اهمیت دارد

Real-Time PCR لازم است اگر:

    • کار تشخیصی انجام می‌دهید
    • به Ct و کمی‌سازی نیاز دارید
    • دقت و حساسیت بالا ضروری است
    • تست‌های ویروسی یا ژنتیکی اجرا می‌کنید
چه زمانی PCR معمولی کافی است و چه زمانی باید Real-Time PCR انتخاب شود؟
چه زمانی PCR معمولی کافی است و چه زمانی باید Real-Time PCR انتخاب شود؟

جمع‌بندی

PCR معمولی و Real-Time PCR هر دو ابزارهای کلیدی در آزمایشگاه‌های مولکولی هستند، اما انتخاب بین آن‌ها کاملاً به نوع کار بستگی دارد.
دستگاه RePure-A برای PCR کلاسیک، تحقیقات مولکولی و پروژه‌های روتین بهترین انتخاب است؛ در حالی‌که Q9600 Pro با سرعت بالا، دقت اپتیکی فوق‌العاده
و قابلیت‌های پیشرفته فلورسنت، گزینه‌ای ایده‌آل برای تست‌های تشخیصی، ویروس‌شناسی و کمی‌سازی DNA محسوب می‌شود.

خبر خوب: هر دو دستگاه RePure-A و Q9600 Pro در شرکت فرداد آزما راد موجود هستند و می‌توانید برای خرید، ثبت سفارش یا دریافت مشاوره تخصصی با تیم ما در ارتباط باشید.